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法國科瑪嘉不動桿菌顯色培養(yǎng)基
用于檢測不動桿菌屬和多重耐藥不動桿菌。
一、儲存
1.基礎(chǔ)干粉需15-30℃保存。
2.增補劑需需在15-30℃保存。
3.MDR選擇性增補劑需2-8℃保存。
二、組分
1.基礎(chǔ)干粉
瓊脂 15.0g/L
蛋白胨﹑酵母浸出物 12.0 g/L
鹽分 4.0 g/L
色素 1.8 g/L
2.液體增補劑
生產(chǎn)調(diào)整因素 1.0 g/L
pH 7.0±0.2
3.MDR增補劑:5支選擇性混合物。
(根據(jù)需要,可以進行經(jīng)典配方的調(diào)整或補充。)
二、準(zhǔn)備
1.取瓶內(nèi)法國科瑪嘉不動桿菌顯色培養(yǎng)基干粉,每3.28g溶于100ml蒸餾水或純水中,可以根據(jù)需要按照比例擴大、縮小。
2.按照1g/L的比例,添加液體增補劑與上述溶液中,攪拌至瓊脂*溶解。
3.加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌,加熱不能超過100℃。
4. 緩慢攪動,水浴冷卻至45-50℃
選擇性步驟:
如果目標(biāo)物為多重耐藥不動桿菌,需按照以下步驟添加MDR增補劑:
1.用5ml蒸餾水復(fù)溶每支MDR增補劑。
2.按照5ml/L的比例,把復(fù)溶的MDR增補劑加入到科瑪嘉不動桿菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。攪拌至均勻。
注意:MDR增補劑溶液2-8℃下可保存兩周。
將培養(yǎng)基傾注于已滅菌的培養(yǎng)皿中,使其凝固,在室溫可保存一天或在冰箱里貯存兩周(避光、干燥,2-8℃)。凝固后平板的顏色有輕微的變化,從黃色轉(zhuǎn)變至淺橘色。
三、接種
1.如果平板放置在冰箱保存,使用前請先恢復(fù)至室溫。
2.傾注樣本至平板上(直接傾注或適當(dāng)?shù)娜鉁鼍髢A注)
3.需氧條件下37℃孵育18-24小時。
四.結(jié)果
初篩微生物 | 菌落色彩 |
不動桿菌培養(yǎng)基: 不動桿菌屬 其它革蘭氏陰性 革蘭氏陽性及酵母菌 MDR不動桿菌顯色培養(yǎng)基: MDR不動桿菌 非MDR不動桿菌 其它革蘭氏陰性 革蘭氏陽性及酵母菌 |
紅色 絕大多數(shù)被抑制 絕大多數(shù)被抑制
紅色 絕大多數(shù)被抑制 絕大多數(shù)被抑制 被抑制 |
注:后的鑒定必須做補充實驗。